環(huán)己基氨基磺酸鈉俗稱“甜蜜素”，有些企業(yè)為調(diào)節(jié)口感而違規(guī)添加甜蜜素或添加含有甜蜜素的復(fù)合調(diào)酒劑，給消費(fèi)者的健康帶來(lái)了極大的隱患。
山東譜析儀器色譜技術(shù)人員針對(duì)國(guó)標(biāo)方法，對(duì)樣品前處理方法進(jìn)行改進(jìn)，以消除相應(yīng)的影響因素并對(duì)氣相色譜儀分析條件進(jìn)行優(yōu)化，降低方法的檢出限。與液相色譜–質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行了比對(duì)試驗(yàn)，證明該方法測(cè)定結(jié)果可靠，操作簡(jiǎn)便，易于推廣。
1. 分析部分
1.1 主要儀器與試劑
國(guó)產(chǎn)氣相色譜儀：譜析GC-17型，配有FID檢測(cè)器，10μL微量進(jìn)樣器；電子分析天平：FA2004B型；
白酒樣品：實(shí)驗(yàn)室抽檢樣品；甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）標(biāo)準(zhǔn)品：純度不低于98%；
環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：1mg／mL，精確稱取0.1000g環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，加入水溶解并定容至100mL，搖勻；正己烷、氯化鈉：分析純；硫酸溶液：100g／L，分析純；亞硝酸鈉溶液：50g／L，分析純；所用試劑除特殊說(shuō)明外均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。
1.2 儀器工作條件
毛細(xì)管色譜柱：HP–INNOWAX柱（30m×0.32mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度：180℃；檢測(cè)器溫度：220℃；程序升溫：初始溫度50℃，保持7min，以50℃／min升至200℃，保持1min；載氣：氮?dú)猓涣魉伲?.0mL／min；氫氣流量：mL／min；空氣流量：300mL／min；尾吹氣流量：25mL／min；進(jìn)樣量：1μL；分流比：5∶1；保留時(shí)間定性，峰面積定量。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液處理和測(cè)定
分別準(zhǔn)確吸取0.00，0.10，0.20，0.40，0.80，1.00，2.00mL環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液于7個(gè)25mL具塞比色管中，加水至10mL置冰浴中，加入2.5mL50g／L亞硝酸鈉及2.5mL100g／L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30min，并經(jīng)常搖動(dòng)，然后準(zhǔn)確加入5mL正己烷、2.5g氯化鈉，振搖100次，分層后取正己烷層進(jìn)樣1μL進(jìn)行色譜分析。對(duì)應(yīng)各點(diǎn)的濃度分別為0.00，0.02，0.04，0.08，0.16，0.20，0.40g/L,根據(jù)分析結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3.2 樣品處理和測(cè)定
稱取100.0g白酒試樣于250mL燒杯中，用40g／L氫氧化鈉溶液調(diào)至堿性，置于水浴鍋上，將白酒樣品揮發(fā)至干，用10mL蒸餾水分3次將殘留物轉(zhuǎn)移至25mL帶塞比色管中，搖勻，置于冰浴中。其余過程同標(biāo)準(zhǔn)溶液處理方法。
1.4 色譜圖
在選定的色譜條件下環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液的色譜圖。
2. 結(jié)果與討論
2.1 樣品處理可行性分析
甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）對(duì)光、熱穩(wěn)定，因此水浴加熱不會(huì)對(duì)其造成影響。白酒中可能存在對(duì)甜蜜素測(cè)定造成影響的醇酯類物質(zhì)如環(huán)己醇等，在蒸干過程中將揮發(fā)掉，不會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果造成影響。
2.2 色譜峰校準(zhǔn)方法
衍生處理后在毛細(xì)管柱上會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)峰，前面的峰較大是環(huán)己醇亞硝酸酯峰，后面的峰較小，是環(huán)己醇峰，但隨著時(shí)間推移，前面的峰逐漸變小，后面的峰逐漸變大，若用一個(gè)峰校準(zhǔn)則結(jié)果誤差較大。通過對(duì)兩個(gè)峰面積的變化趨勢(shì)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，單個(gè)峰的面積是不斷變化的，而兩個(gè)峰面積之和基本處于平衡，因此選擇兩個(gè)峰面積之和進(jìn)行定量，結(jié)果更
加準(zhǔn)確可靠。儀器工作站中有峰面積加和定量的功能，計(jì)算方便快捷。
2.3 工作曲線
對(duì)1.3.1中的系列環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，以環(huán)己基氨基磺酸鈉濃度X(g／L)為橫坐標(biāo)，以色譜峰面積Y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果顯示，在0.02～0.40g／L濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，線性方程為Y=1565.32X–2.27，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9998。
2.4 方法檢出限
在國(guó)標(biāo)方法的基礎(chǔ)上，通過以下措施降低方法的檢出限：(1)用毛細(xì)管色譜柱代替填充柱，穩(wěn)定性和靈敏度都明顯提高；(2)在樣品處理過程中，采用增大樣品量進(jìn)行蒸干濃縮的方式；(3)在衍生過程中減少加水量及衍生試劑的加入量；(4)將萃取過程正己烷的加入量減半，相當(dāng)于增大濃縮倍數(shù)，經(jīng)回收試驗(yàn)驗(yàn)證符合要求。以3倍信噪比計(jì)算儀器的檢出限為2mg／L，經(jīng)換算，方法的檢出限為0.1mg／kg，與SN／T1948–2007液質(zhì)方法檢出限（0.10mg／kg）相吻合，證明該方法可以用于白酒中甜蜜素的檢測(cè)。
2.5 回收試驗(yàn)
分別選取3種不同香型陰性白酒樣品，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果及回收率計(jì)算結(jié)果見表2。由表2可知，不同香型白酒中甜蜜素回收率沒有明顯差別，在88%~96%之間。
2.6 比對(duì)試驗(yàn)
為驗(yàn)證該方法測(cè)定白酒中甜蜜素含量的準(zhǔn)確性，選取6個(gè)陽(yáng)性白酒樣品，分別用氣相色譜法與液相色譜–質(zhì)譜法進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，結(jié)果見表3。由于液相色譜–質(zhì)譜法測(cè)定白酒中的甜蜜素是通過基質(zhì)匹配繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，排除了白酒基質(zhì)的干擾，濾膜過濾之后進(jìn)行測(cè)定，不存在較大的損失，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高；氣相色譜法測(cè)定的結(jié)果相對(duì)于液質(zhì)法略低，原因是由于氣相色譜法樣品前處理中衍生過程和萃取過程都比較復(fù)雜，會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果造成一定的影響，但兩種方法測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差為3.3%~8.3%，在誤差允許范圍之內(nèi)。
3. 總結(jié)
山東譜析儀器建立了用毛細(xì)管色譜柱氣相色譜法測(cè)定白酒中甜蜜素含量的方法，在樣品前處理過程中通過增大樣品量、水浴蒸干濃縮、適當(dāng)減少衍生試劑用量和最終溶劑萃取體積，增大了樣品濃縮倍數(shù)，大大降低了方法檢出限，方法的精密度、準(zhǔn)確度和回收率均符合檢測(cè)要求。該方法與液質(zhì)連用法相比運(yùn)行成本低，易于推廣。
