談?wù)?a >液相色譜儀 制備液相和分析液相有什么區(qū)別
和制備液相對應(yīng)的,是分析液相。它們的蕞大差別,不在于外形,而在于目的。
分析液相的目的當然是為了分析樣品,有什么成分,含量多少,也叫做定性定量。要做好分析液相,最關(guān)注的是分離度和靈敏度,要分得開,測得到,測得準。
而制備液相是利用色譜柱的分離能力,來去除雜質(zhì),得到高純樣品。
為什么強調(diào)純度呢?在實驗室里,紅外、紫外、核磁這些儀器,都要求樣品達到足夠的純度,才能得到準確的結(jié)果。除了實驗室,藥品的生產(chǎn)也需要純化,特別是生物制品和藥劑。
很多生物制品如果是直接吃下去,跟吃個雞蛋也沒什么不同,直接注射才能保留活性成份。
而注射治療,藥物會直接進入血液,所以純度非常重要。在實驗室里,用于制備的液相,配置和普通的分析液相差不多。有泵,有進樣器,有柱子,有檢測器。
為了收集分離出來的化合物,制備液相通常還配一個餾分收集器。餾分收集器就像液相色譜的收納盒,把每次分析的同類物質(zhì)收納到一起。餾分收集器可以直接串聯(lián)在檢測器后面。也可以連接一個三通,和檢測器并聯(lián),都接在色譜柱的后面。有些實驗室里需要收集的量很大,一個餾分收集器裝不完,還可以并聯(lián)好幾個。
根據(jù)檢測器的信號顯示,當化合物出峰的時候,儀器會自動收集。一般按照時間編程,也可以根據(jù)檢測器的信號強度自動觸發(fā)。一個個化合物通過餾分收集器收集到小瓶或者試管里,也可以通過管路連接到更大的瓶子。
制備液相有很多種分類方法,比如按壓力分類,或者按產(chǎn)量分類,彼此之間有交叉,沒有明確的標準。不同類型的制備液相有著不同的特點。比如這根用在生產(chǎn)上的制備液相柱,模樣和實驗室里有些不同。僅僅內(nèi)徑就有1.6m,色譜柱的重量有36噸重,每天消耗的流動相能放滿半個小游泳池。除了特別大的,還有特別小的。比如微克級制備,也常被稱為微量制備,它的有趣之處在于微量餾分收集器,可以直接使用MALDI點樣板MALDI實現(xiàn)離子化的關(guān)鍵是將樣品和基質(zhì)混合,再點在靶板或叫點樣板上,用激光打擊基質(zhì),就可以實現(xiàn)離子化。
而現(xiàn)在的微量餾分收集器,可以將Nano液相分離之后的化合物直接點在MALDI的點樣板上,并且自動的添加基質(zhì)。這樣無縫連接的合作,即發(fā)揮了液相的分離純化功能,又簡化了MALDI的樣品制備,在生命科學和藥物分析領(lǐng)域都有著非常廣闊的應(yīng)用前景。
不論是制備液相還是相關(guān)的聯(lián)用技術(shù),都還在不斷的發(fā)展和進步,不斷的更新和突破,所以給出的建議常常處于變化之中。
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